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基于微通道內(nèi)表面張力控制和驅(qū)動(dòng)的分析新方法研究
來源:劉江疆 瀏覽 1449 次 發(fā)布時(shí)間:2022-10-27
微流控芯片技術(shù)以其高通量、低消耗、快速分析等特點(diǎn)在生化分析、醫(yī)療診斷領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。降低微流控芯片的加工和使用成本,簡化儀器設(shè)備的需求,將其更好地應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)是本論文力求解決的關(guān)鍵問題。
本論文以微通道內(nèi)的表面張力作用為核心,提出了五種分析新方法,對(duì)微通道內(nèi)的各種操作與驅(qū)動(dòng)技術(shù)進(jìn)行了有益的探索。提出了一種在微通道內(nèi)測(cè)定液體表面張力的新方法,僅使用15微升的樣品在一分鐘內(nèi)即可測(cè)定多組平行數(shù)據(jù),同時(shí)能夠進(jìn)行變溫條件下的表面張力測(cè)定。對(duì)七種有機(jī)溶劑的測(cè)定結(jié)果表明此方法具有較高的準(zhǔn)確度(0.4-6.4%)和精密度(RSD2%,n=9)。設(shè)計(jì)了一種新型的進(jìn)樣口,利用表面張力的作用在微通道內(nèi)生成體積可控(74-576
nL)的均一液滴(RSD0.56%,n=70),避免了載液的使用和流速對(duì)液滴狀態(tài)的影響。同時(shí)實(shí)現(xiàn)了微通道內(nèi)液滴的融合和液滴內(nèi)試劑的高速混合,利用兩種控制液滴運(yùn)動(dòng)的手段,在1秒內(nèi)實(shí)現(xiàn)試劑的完全混合。
利用表面張力控制聚苯乙烯微珠的自組裝,將其用做模板通過軟光刻法加工陣列式芯片用于單細(xì)胞的研究。加工模板時(shí)間少于十分鐘,具有結(jié)構(gòu)尺度可調(diào)的優(yōu)點(diǎn),適合固定各種尺寸的細(xì)胞用于單細(xì)胞研究。建立了一種使用光刻法在微通道內(nèi)加工凝膠微結(jié)構(gòu)固定生物分子和細(xì)胞的方法。使用表面張力進(jìn)樣技術(shù)進(jìn)行了微通道內(nèi)的生化分析,對(duì)DNA分子的檢測(cè)限達(dá)到1
pM。利用熒光顯微鏡精確控制激發(fā)光,實(shí)現(xiàn)了微通道內(nèi)單細(xì)胞的選擇性捕獲與研究,操作簡便且固定細(xì)胞速度較快(5 s)。
發(fā)展了紙基微流控芯片技術(shù),將其成功的應(yīng)用在質(zhì)譜的常態(tài)離子化檢測(cè)中,能夠?qū)﹄暮偷鞍踪|(zhì)等各種分子進(jìn)行直接檢測(cè),檢測(cè)限達(dá)到ppb級(jí)。利用紙基微流控芯片對(duì)復(fù)雜樣品的前處理能力,實(shí)現(xiàn)了對(duì)血液和尿樣中藥物和毒品的定性與定量分析,具有樣品消耗少(1μL),檢測(cè)速度快(1
min),準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)。同時(shí)還實(shí)現(xiàn)了樣品的預(yù)分離和在線衍生化的應(yīng)用。